Ce kit à trois réactifs pour la coloration des amyloïdes se caractérise par sa force ionique élevée et son pH qui renforcent la spécificité de la liaison du rouge Congo aux agrégats amyloïdes. Cette méthode, mise au point par Puchtler, demeure la méthode de référence pour l'étude des amyloïdes dans les coupes tissulaires.
Le colorant Rouge Congo se lie aux fibrilles et forme un motif régulier de molécules de colorant. La régularité structurale du colorant, observée en lumière polarisée, révèle une biréfringence, se traduisant par une coloration verte.
Un pH et une force ionique élevés, conformément au protocole de Puchtler, permettent une meilleure spécificité du colorant pour les amyloïdes. Les agrégats amyloïdes présentent une biréfringence, ce qui permet une coloration verte sous lumière polarisée.