L'ADN polymérase Taq highQu est l'enzyme classique pour les applications PCR de routine, offrant des rendements d'amplification élevés de cibles de 3 à 5 kb dans diverses conditions. L'ADN polymérase Taq est purifiée à partir d'une souche recombinante d'E. coli portant le gène de l'ADN polymérase Taq.
L'ADN polymérase Taq est une ADN polymérase 5' → 3' thermostable. Elle n'a pas d'activité exonucléase 3' → 5' (relecture) et a une faible activité exonucléase 5' → 3'. La polymérase présente une activité désoxynucléotidyl transférase qui entraîne un surplomb A à l'extrémité 3' des produits PCR et permet le clonage TA. La précision de la PCR de l'ADN polymérase Taq est de 4,5 x 104 (nombre de nucléotides incorporés avant que la première erreur ne se produise).
Le tampon de réaction fourni, pour une plus grande flexibilité dans l'optimisation, ne contient pas de dNTP ni de magnésium. La solution de MgCl2 50 mM est fournie séparément, ce qui permet d'optimiser la concentration finale de magnésium de 1 mM à 4 mM selon les besoins. Les dNTP en kits ou en mélanges peuvent être achetés séparément auprès de highQu.
L'enzyme PCR la plus utilisée est l'ADN polymérase de Thermus aquaticus. L'ADN polymérase Taq amplifie l'ADN modèle en ajoutant des nucléotides à l'extrémité 3' d'un brin d'ADN en fonction du modèle, où de courtes amorces monocaténaires qui s'annulent sur le modèle fournissent un point de départ pour la polymérisation.
L'enzyme a une activité polymérase 5' - 3' et ne possède pas d'exonucléase 3' - 5' ou d'activité de relecture. Pour une performance optimale, l'ADN polymérase Taq a besoin non seulement d'ADN matrice et d'amorces inverses et directes, mais aussi de composants essentiels à la réaction PCR tels que les désoxyribonucléotides triphosphates (dNTP) et le chlorure de magnésium. Les tampons optimisés généralement fournis avec les enzymes Taq polymérase commerciales contiennent une certaine concentration de sel et ont une valeur de pH équilibrée.
L'ADN polymérase Taq possède plusieurs autres propriétés avantageuses par rapport aux autres enzymes utilisées pour la PCR. Elle est connue pour sa grande stabilité et sa résistance aux inhibiteurs de la PCR. Cette résistance aux inhibiteurs permet de réaliser des réactions PCR directes à partir de modèles bruts non purifiés, comme la PCR de colonies.
Chez highQu, l'ADN polymérase Taq est disponible sous forme d'enzyme autonome fournie avec un tampon ALLin™ ou sous forme de mastermix concentré 2X.